廣東無菌室的建設，無菌室應建在較潔凈的環境內，四周無污染源。無菌室內部裝修應平整，光滑，無凹凸不平或棱角等，四壁及屋頂應用不透水的材質，便于擦洗及自凈。無菌室內的操縱臺，椅子的材質也應是易清洗消毒的。室內采光面積大，從室外應能看到室內情況。室內門窗結構應密合，并盡量減少活動窗口面積。無菌室應設有工作間，緩沖間和更衣間，其內均應設有消毒設備，如選用紫外燈，則其離地高度不能超過2.2米。消毒設備的電源開關均應設在室外。工作間與緩沖間進出口應設拉門，門縫要封緊，兩門應錯開，以免空氣對流造成污染。
廣東無菌室內不可使用中心空調，應使用帶有過濾系統的空調。無菌室內溫度應保持在20-24℃，濕度保持在45-60%。無菌室內不可設置水槽和水。無菌室的使用與治理，無菌室應保持清潔整潔，室內僅存放必須的檢驗用具如酒精燈，酒精棉，打火機，鑷子,接種針,接種環等,與檢驗無關的物品不得進內。無菌室應備有工作濃度的消毒液,如:5%的甲酚溶液,75%的酒精,0.1%的新潔爾滅等。定期檢查室內空氣無菌狀況,細菌數應控制在10個以下,發現不符合要求時,應立即*消毒自凈,并重復檢查。無菌室自凈前,應將所有物品置于操縱之部位(供試品例外),然后打開紫外燈自凈30分鐘.紫外燈封閉30分鐘后,工作職員方可進內。工作職員在進進無菌室前,必須用肥皂洗手,然后更衣室更換工作服,帽,口罩,鞋,方可進進無菌室。
從室外帶進無菌室內的所有物品表面要用75%酒精或紫外照射預先消毒.無菌操縱前用75%酒精消辣手掌,手背。供試品在檢查前,應保持外包裝完整,不得開啟,以防污染.檢查前,用75%的酒精棉球消毒外表面。每次操縱過程中,均應作陰性對照,以檢查無菌操縱的可靠性。接種針使用前后,必須通過火焰灼燒自凈,待冷卻后,方可接觸菌種。操縱過程中,如有菌液灑在桌上或地上,應立即用5%石炭酸溶液或3%的來蘇水傾覆被污染處至少30分鐘,再作處理.工作衣帽等受到菌液污染時,應立即脫往,高壓蒸汽自凈后洗滌。凡是帶有活菌的物品,必須經過消毒后,才能清洗。操縱應嚴格按照無菌操縱規定進行,操縱中少說話,不喧嘩,以保持環境的無菌狀態。操縱完畢,應及時清理無菌室,再用紫外燈輻照自凈30分鐘。每2-3周用2%石炭酸水溶液擦拭工作臺，門，窗,桌,椅及地面,然后用3%石炭酸水溶液噴霧消毒空氣,后紫外燈自凈半小時。無菌室用具及空間的自凈消毒方法:
培養基,藥品和生理鹽水:采用高壓蒸汽自凈,一般為121℃15分鐘,有的培養基有特殊要求,應分別處理。玻璃器皿,剪刀,鑷子:高溫干燥自凈,置于干燥箱中160℃自凈2小時。接種針,接種環:直接用火焰灼燒自凈。工作服,口罩,帽子等:采用高壓蒸汽自凈,一般為121℃30分鐘;也可以用臭氧發生器自凈,1小時。
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